Alloxan diabetes alters the tensile strength, morphological and morphometric parameters of abdominal wall healing in rats

To investigate the effects of alloxan diabetes on the abdominal wall healing of rats undergoing laparotomy. METHODS: Ninety-six male Wistar rats weighing between 200 and 300 grams, divided into two groups: non-diabetic group (G1) and another with untreated diabetes (G2). Three months after diabetes induction, the animals underwent a 5cm-long- laparotomy and 5.0 nylon monofilament suture. After the surgery, 12 animals from each group were euthanized on days 4, 14, 21 and 30 corresponding to the moments M1, M2, M3 and M4. In each moment a fragment of the abdominal wall containing the scar was removed for tensile strength measurement, histological and morphometric study. Clinical and biochemical parameters were also analyzed. RESULTS: G2 animals showed parameters compatible with severe diabetes and decreased plasma levels of insulin. The tensile strength in G2 was significantly smaller in M2 and M4, with a tendency to fall in the other two. Through light microscope, diabetic animals showed more difficulty to increase collagen density and contraction. G2 animals showed high cellularity of fibroblasts in later healing moments, with collagen thinning in M2 and M4. CONCLUSION: The abdominal wound healing in untreated diabetic animals was altered and led to a higher incidence of dehiscence and infections.

Nephrocalcinosis induced by hyperoxaluria in rats

PURPOSE: To investigate nephrocalcinosis due to hyperoxaluria induced by two different inducing agents in rats. METHODS: Forty Sprague-Dawley male rats were randomly distributed into four groups: Group1 (Clinical control, n = 10); Group 2 (0.5% Ethylene Glycol + Vitamin D3, n = 10); Group 3 (1.25% Ethylene Glycol, n = 10); and Group 4 (5%Hydroxy L-proline, n = 10). Five animals from each group were euthanized after one week of follow-up (M1 Moment) and the remaining, after four weeks (M2 Moment). All animals underwent 24h urine dosages of calcium, oxalate, uric acid, citrate and serum creatinine. Histology and histomorphometric analyses were performed using Image J program in the hematoxylin-eosin stains. Calcium deposits in the renal parenchyma were quantified by PIXE technique (Proton Induced X-Ray Emission). RESULTS: 24h urinary parameters did not show any significant variations after 28 days of experiment except by hyperoxaluria that was significantly higher in Group 3. Histomorphometric analyses showed a significantly higher nephrocalcinosis in Group 2 (p<0.01). The calcium deposits in the renal parenchyma were 10 and 100 times higher in Group 2 in comparison to other groups in the M1 and M2 moments, respectively. CONCLUSION: The Group 2 (vitamin D3+Ethylene Glycol 0.5%) was the best model to induce nephrocalcinosis in rats after 28 days.

Tissue expression of CD10 protein in colorectal carcinoma: correlation with the anatomopathological features of the tumor and with lymph node and liver metastases

BACKGROUND: The reduced expression of CD10 may be related to unfavorable prognosis of patients with colorectal carcinoma. The authors analyzed the tissue immunostaining of CD10 protein in colorectal carcinoma and its relationship to clinicopathologic features. METHOD: In 130 patients submitted to colorectal carcinoma surgery, a tissue microarray block was obtained from the tumor and adjacent non-neoplastic mucosa and submitted to immunohistochemistry with monoclonal antibody CD10. The immunostaining was evaluated by semi-quantitative method, with stained cell count in percentage. The results were related to the location, anatomopathological features, presence of lymph node and hepatic metastases and TNM staging of the colorectal neoplasm. The statistical analysis was performed with the Mann-Whitney, Kruskal-Wallis and Fisher exact tests. RESULTS: The expression of CD10 marker was higher in colorectal tumor tissue than in adjacent non-neoplastic mucosa (p<0.0001) and was higher than in exophytic lesions (p=0.04). The expression of CD10 protein was not associated with other clinical and pathological aspects of colorectal neoplasm. CONCLUSIONS: The expression of CD10 protein was more intense in tumor tissue of colorectal carcinoma than in adjacent non-neoplastic mucosa and was related to the exophytic appearance of the tumor. (AU)

INTRODUÇÃO: A expressão reduzida de CD10 pode estar relacionada com prognóstico desfavorável de doentes com carcinoma colorretal. Analisou-se a imunoexpressão tecidual da proteína CD10 no carcinoma colorretal e sua relação com os aspectos clinicopatológicos. MÉTODO: Em 130 doentes operados por carcinoma colorretal, um bloco de tissue microarray foi obtido do tecido neoplásico e da mucosa não neoplásica adjacente e submetido ao estudo imuno-histoquímico com anticorpo monoclonal CD10. Avaliou-se a imunoexpressão por método semiquantitativo, com contagem do percentual de células coradas. Os resultados foram relacionados com a localização, aspectos anatomopatológicos, presença de metástases linfonodais e hepáticas e estadiamento TNM da neoplasia. O estudo estatístico foi realizado com os testes de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e exato de Fisher. RESULTADOS: A expressão do marcador CD10 foi maior no tecido do carcinoma colorretal do que na mucosa não neoplásica adjacente (p<0,0001) e foi maior nas lesões exofíticas (p=0,04). A expressão da proteína CD10 não apresentou relação com os demais aspetos clínicos e patológicos da neoplasia colorretal. CONCLUSÕES: A expressão da proteína CD10 foi mais intensa no tecido neoplásico do carcinoma colorretal do que na mucosa não neoplásica adjacente e relacionou-se com o aspecto exofítico do tumor. (AU)

Correlation between immunoexpression of BCL-2 protein family with apoptosis index, cellular proliferation and survival in colorectal carcinomas

OBJECTIVES: To evaluate the Bcl-2, Bax, Bad and Bak immunoexpression in tumor and nontumorous tissue of 130 patients with colorectal carcinoma submitted to surgery at São Paulo Hospital, EPM/UNIFESP, from 2002 to 2005, and to correlate the immunoexpression data with the apoptotic index (AI, obtained by anti-cleaved caspase 3 and M30 labeling), cell proliferation score (CPS, obtained by Ki-67), immunoexpression of p53 and patient's clinical prognosis. RESULTS: Positive correlation was verified between Bcl-2 protein family in tumor and nontumor tissue. Only Bcl-2 protein correlated with IA and CPS in the tumor. Positive correlation was observed between pro-apoptotic proteins and Bcl-2 protein. In the adjacent mucosa, Bcl-2 correlated with Ki-67 and p53, but not with IA. Carcinomas exhibited higher immunoexpression of CPS and IA markers. No correlation occurred between immunoexpression data and patient survival. CONCLUSION: Positive correlation was observed between the pro-apoptotic proteins of the Bcl-2 family and the anti-apoptotic protein Bcl-2. In the adjacent nontumor mucosa, Bcl-2 correlated with Ki-67 and p53, but not with AI. Carcinomas presented greater immunoexpression for CPS and AI markers; however immunoexpression of these markers was not correlated with patient survival.

NM23 protein expression in colorectal carcinoma using TMA (tissue microarray): association with metastases and survival / Expressão da proteína NM23 no carcinoma colorretal preparado em TMA (tissue microarray): associação com metástases e sobrevivência

CONTEXT: NM23, a metastasis suppressor gene, may be associated with prognosis in patients with colorectal carcinoma. OBJECTIVE: To analyze NM23 expression and its association with the presence of lymph node and liver metastases and survival in patients operated on for colorectal carcinoma. METHODS: One hundred thirty patients operated on for colorectal carcinoma were investigated. Tissue microarray blocks containing neoplastic tissue and tumor-adjacent non-neoplastic mucosa were obtained and analyzed by immunohistochemical staining using a monoclonal anti-NM23 antibody. Immunohistochemical expression was assessed using a semiquantitative scoring method, counting the percentage of stained cells. The results were compared regarding morphological and histological characteristics of the colorectal carcinoma, presence of lymph node and liver metastases, tumor staging, and patient survival. Statistical analysis was performed using the Mann-Whitney test, the Kruskal-Wallis test and Fisher's exact test. Survival analysis was performed using the Kaplan-Meier method and the log-rank test. RESULTS: NM23 expression was higher in colorectal carcinoma tissue than in adjacent non-neoplastic mucosa (P<0.0001). NM23 protein expression did not correlate with degree of cell differentiation (P = 0.57), vascular invasion (P = 0.85), lymphatic invasion (P = 0.41), perineural infiltration (P = 0.46), staging (P = 0.19), lymph node metastases (P = 0.08), or liver metastases (P = 0.59). Disease-free survival showed significant association (P = 0.01) with the intensity of NM23 protein immunohistochemical expression in colorectal carcinoma tissue, whereas overall survival showed no association with NM23 protein expression (P = 0.13). CONCLUSIONS: NM23 protein expression was higher in neoplastic colorectal carcinoma tissue than in adjacent non-neoplastic mucosa, showing no correlation with morphological aspects, presence of lymph node or liver metastases, colorectal carcinoma staging, or overall survival. Disease-free survival was higher in patients with increased NM23 expression.

CONTEXTO: O NM23, denominado de gene supressor de metástases, pode estar relacionado com o prognóstico em doentes com carcinoma colorretal. OBJETIVOS: Analisar a expressão do marcador tumoral NM23 relacionando-a com a presença de metástases linfonodais e hepáticas e com a sobrevivência dos doentes operados por carcinoma colorretal. MÉTODO: Cento e trinta doentes operados por carcinoma colorretal foram analisados. Blocos de "tissue microarray" foram obtidos com tecido neoplásico e com mucosa não neoplásica adjacente ao tumor e submetidos ao estudo imunoistoquímico com o anticorpo monoclonal NM23. A imunoexpressão foi avaliada por método semiquantitativo, com contagem do percentual de células coradas. Os resultados encontrados foram relacionados com as características morfológicas e histopatológicas do carcinoma colorretal, presença de metástases linfonodais e hepáticas, estádio e sobrevivência dos doentes. O estudo estatístico foi realizado com os testes de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e exato de Fisher. A análise da sobrevivência foi calculada pelo método de Kaplan-Meier e pelo teste de long-rank. RESULTADOS: A expressão do marcador NM23 foi maior no tecido do carcinoma colorretal do que na mucosa não-neoplásica adjacente (P<0,0001). A expressão da proteína NM23 não apresentou relação com o grau de diferenciação celular (P = 0,57), invasão vascular (P = 0,85), invasão linfática (P = 0,41), infiltração perineural (P = 0,46), estádio (P = 0,19), metástases linfonodais (P = 0,08) ou metástases hepáticas (P = 0,59). A sobrevivência livre de doença mostrou relação significante (P = 0,01) com a intensidade de imunoexpressão da proteína NM23 no tecido do carcinoma colorretal, e a sobrevivência global não mostrou relação com a expressão da proteína NM23 (P = 0,13). CONCLUSÕES: A expressão da proteína NM23 foi mais intensa no tecido neoplásico do carcinoma colorretal do que na mucosa não-neoplásica adjacente. A expressão da proteína NM23 não se relacionou com os aspectos morfológicos, presença de metástases linfonodais ou hepáticas, estádio do carcinoma colorretal ou com a sobrevivência global. A sobrevivência livre de doença foi maior nos doentes com expressão aumentada do gene supressor de metástases NM23.

Correlation between the immunohistochemical expressions of MMP-1, MMP-7 and VEGF and prognostic factors in colorectal adenocarcinoma / Correlação entre as expressões imunohistoquímicas da MMP-1, MMP-7 e do VEGF no adenocarcinoma colorretal com fatores prognósticos

PURPOSE: To analyze the expression of metalloproteinase-1, metalloproteinase-7 and vascular endothelial growth factor (VEGF) in colorectal adenocarcinoma, and to correlate these with the clinical-pathological prognostic factors. METHODS: Tumor tissue from 82 patients was fixed in formalin and embedded in paraffin blocks. These samples were analyzed by means of the streptavidin-biotin immunohistochemical method, using the tissue microarray technique. Marker positivity was evaluated using categorical scores that determined cutoff percentages of stained tumor cells. Protein tissue expression was correlated with the variables of degree of cell differentiation, staging, disease-free interval, recurrence, survival and specific mortality. The Fisher exact and Kaplan-Meier tests were used to assess associations between the markers and the study variables. The log-rank and Wilcoxon tests were used to assess the significance of differences between curves of disease-free interval and survival. RESULTS: All tumors were positive for metalloproteinase-1; 50 (61 percent) were positive and 32 (39 percent) were negative for metalloproteinase-7; and 60 (74.1 percent) were positive and 21 (25.9 percent) were negative for VEGF. Correlation of marker expression, both in groups and individually, did not show statistical significance in relation to the degree of cell differentiation, staging, disease-free interval, survival or specific mortality. Recurrence showed a statistically significant correlation with positive expression of the three markers, when analyzed as a group (p = 0.038). CONCLUSION: The associated expression of metalloproteinase-1, metalloproteinase-7 and VEGF in colorectal adenocarcinoma is related to the incidence of disease recurrence.

OBJETIVO: Analisar as expressões da metaloproteinase-1, metaloproteinase-7 e do fator de crescimento endotelial vascular no adenocarcinoma colorretal e correlacionar com os fatores prognósticos clínico-patológicos. MÉTODOS: Foram analisados tecidos fixados em formol e dispostos em blocos de parafina dos tumores de 82 pacientes, por imunohistoquímica, pelo método da estreptavidina-biotina, usando-se a técnica de arranjo em matriz de amostras teciduais (tissue microarray). Na avaliação da positividade dos marcadores foi utilizado um escore categórico, que predeterminou o valor de corte na percentagem de células coradas do tumor. As expressões teciduais das proteínas foram correlacionadas com as varáveis representadas pelo grau de diferenciação celular, estadiamento, tempo livre de doença, recidiva, sobrevida e mortalidade específica. Foram empregados os testes exato de Fisher e de Kaplan-Meier para verificar as associações dos marcadores com as varáveis estudadas. Para testar a significância das diferenças entre as curvas do tempo livre de doença e da sobrevida foram utilizados os testes de longrank e Wilcoxon. RESULTADOS: A metaloproteinase-1 foi positiva em todos os tumores. A metaloproteinase-7 foi positiva em 50 (61 por cento) e negativa em 32 (39 por cento) tumores. O fator de crescimento endotelial vascular foi positivo em 60 (74,1 por cento) e negativo em 21 (25,9 por cento) tumores. A correlação das expressões dos marcadores realizada separadamente e em conjunto não apresentou significância estatística com o grau de diferenciação celular, estadiamento, tempo livre de doença, sobrevida e mortalidade específica. A recidiva apresentou correlação estatística significante com a expressão positiva dos três marcadores, quando foram analisados em conjunto (p = 0,038). CONCLUSÃO: As expressões associadas da metaloproteinase-1, metaloproteinase-7 e do fator de crescimento endotelial vascular no adenocarcinoma colorretal se relacionam com ...

Perda de amostras em tissue microarray: comparação entre técnicas com uso de fita adesiva comercial, lâminas silanizadas pelo método tradicional ou por método modificado / Loss of tissue samples in the tissue microarray: comparison between techniques using commercial adhesive tape, silane-coated microslides by the conventional method and by a modified technique

Introdução/objetivo: O microarranjo tecidual, ou tissue microarray (TMA), permite avaliar múltiplas amostrasde tecido em um único bloco. Um dos problemas do TMA é o descolamento dos cortes teciduais, por isso, para reduzir essa perda, tem-se utilizado fita adesiva especial comercial. Não há relatos comparando o uso dessas fitas adesivas com a técnica de silanização modificada. O objetivo desse estudo foi comparar as perdas de cortes entre lâminas usando fitas adesivas comerciais, lâminas silanizadas por técnica convencional elâminas silanizadas por técnica modificada, com menor consumo de acetona. Material e método: O TMA foiconstruído com blocos de tecido hepático, em dispositivo de base fixa, colocando-se 32 cilindros de 2 mmde diâmetro em duplicata e espaçamento de 2,2 mm. Quinze secções de 4 μm foram colocadas em lâminas silanizadas a 4% por técnica convencional (grupo 1), 15 em lâminas silanizadas com técnica modificada (6%de silano e com uso mínimo de acetona) (grupo 2) e 15 em lâminas com fita adesiva comercial de acordo comas recomendações do fabricante (grupo 3). Todas as lâminas foram processadas por imuno-histoquímica para citoqueratina 18, com recuperação antigênica em tampão citrato pH 6, em microondas. As perdas de amostrasforam quantificadas e expressas como: perda total (≥ 80%), quase total (75% a 79%) ou parcial (50% a 74%).Resultados: A perda de tecidos foi semelhante nos três grupos: com silanização tradicional, modificada oufita adesiva comercial (4,9 vs. 3,1 vs. 8,1, respectivamente) (análise de variância [ANOVA], p = 0,3654). Umadas lâminas com a fita adesiva apresentou descolamento artefatual de todos os tecidos e outra de 20 tecidosem um dos lados. Nenhuma das lâminas silanizadas apresentou tal artefato. Conclusão: Lâminas silanizadas têm resultados satisfatórios, requerem menos treinamento técnico e reduzem os custos da utilização do TMA justificando seu uso em pesquisa...

Introduction/objective: The tissue microarray (TMA) technique allows the evaluation of multiple tissue samplesin a single block. One of the problems of TMA is the ungluing of tissue sections, thus commercial adhesive tape has been used to reduce this loss. There are no reports comparing the use of the commercial adhesive tape with the use of the modified silane-coated technique. The objective of this study was to compare section loss in slides using commercial adhesive tape, silane-coated microslides with the conventional technique or with the modified technique. Material and method: The TMA was constructed with hepatic tissue blocks embedded in paraffin, using a fixed base device, placing 32 cylinders of 2 mm in diameter in duplicate and 2.2 mm apart from each other. Fifteen 4-μm sections were placed on conventional silane-coated microslides at 4% (Group 1), 15 on silane-coated microslides with a modified technique (6% of silane and minimum use of acetone) (Group 2), and 15 on slides using commercial adhesive tape, according to the manufacturer's recommendations (Group 3). All microslides were processed by immunohistochemistry for cytokeratin 18, with antigen retrieval accomplished by incubation with citrate buffer pH 6.0 with microwave enhancement. Samples loss was quantified and expressed as: total (≥ 80%), almost complete (75% to 79%) or partial (50% to 74%). Results: The loss of sections was similar in all three groups (4.9 vs. 3.1 vs. 8.1, respectively) (analysis of variance [ANOVA], p = 0.3654). One slide usingcommercial adhesive tape showed artifactual ungluing of all sections and another one showed loss of 20 sampleson one side of the slide. None of the silane-coated microslides showed such artifact. Conclusions: Silane-coated microslides show adequate results, require less technical training and reduce the cost of TMA procedure, whatjustifies their use in research...

Regiões organizadoras nucleolares argirofílicas no sarcoma sinovial / Argyrophilic nucleolar organizer regions in synovial sarcoma

Regiões organizadoras nucleolares (NORs) correspondem a alças do DNA contendo genes responsáveis pela transcrição do RNA ribossômico, de 18S e 28S, situados no nucléolo da célula. Por possuírem reatividade com a prata são chamadas de AgNORs. O presente estudo investigou a correlação entre o número de AgNORs por núcleo e o prognóstico em dez sarcomas sinoviais diagnosticados no Hospital A. C. Camargo, entre 1972 e 1986, com informações confiáveis de seguimento clínico. A análise dos resultados não revelou correlação entre as variáveis estudadas, mostrando que o número de casos investigados e sua homogeneidade morfológica não permitem conclusões acerca do valor prognóstico dos AgNORs nos sarcomas sinoviais. Outrossim, o método se revelou barato, rápido e de aplicação simples para todo e qualquer serviço de patologia cirúrgica, podendo ser útil para avaliação da proliferação celular na rotina de laboratórios de pequeno porte.

Pneumatose cistica intestinal associada a ulcera duodenal estenosante e ulcera gastrica perfurada. Relato de caso / Intestinal cystic pneumatosis associated with duodenal ulcer estenosis and perforated gastric ulcer

O presente artigo descreve um caso de pneumatose cistica intestinal (PCI) em um homem de 66 anos, cuja doença de base era uma ulcera duodenal estenosante. O paciente foi operado em carater de urgencia, quando apresentou tambem perfuraçao de uma ulcera gastrica e peritonite fibrinopurulenta. A PCI foi um achado da laparotomia, assim como calculos na vesicula biliar, sendo que a cirurgia realizada foi uma resseçao intestinal, gastrectomia BII e colecistectomia. A evoluçao pos-operatoria foi satisfatoria e a alta ocorreu no 7§ dia

Esquistossomose mansônica experimental em camundongos submetidos a dieta hipoprotêica

Investigou-se o efeito de dieta moderadamente hipoprotêica (15 g%) de proteínas) sobre o curso de equistossomose mansônica, em camundongos albinos experimentalmente infectados, comparada a dieta normoprotéica (24 g% de proteínas). A dieta hipoprotêica foi administrada a dois grupos de camundongos: desde o desmame e desde a infecçäo por S. mansoni. Determinou-se o índice de letalidade e os pesos corporal, hepático e esplênico nos três grupos de camundongos infectados por S. mansoni (dieta normoprotêica, dieta hipoprotêica desde o desmame e dieta hipoprotêica desde a infecçäo). Determinou-se, também, o comprimento antigido pelos exemplares de S. mansoni, recuperados nos três grupos de camundongos. Os resultados indicaram índice de letalidade significativamente superior entre os grupos de camundongos alimentados com dieta hipoprotêica. Näo foi possível, entretanto, demonstrar a existência de diferenças significativas entre os valores encontrados para os pesos corporal, hepático e esplênico nos três grupos considerados. Também näo se conseguiu evidenciar diferenças significativas com relaçäo ao comprimentodos exemplares de S. mansoni obtidos nos camundongos alimentados com dietas normo e hipoprotêica